Molecular Investigation of Enterococcal Surface protein (esp)gene of Enterococcus faecalis isolated from endodontic patients

Eman A. Mustafa; Amera  M. AL-Rawi

doi:10.5937/mckg57-46998

Eman A. Mustafa Department of Biology, College of Science, University of Mosul, 41002, Mosul, Iraq.
Amera M. AL-Rawi Department of Biology, College of Science, University of Mosul, 41002, Mosul, Iraq.

DOI: https://doi.org/10.5937/mckg57-46998

Ključne reči: Ентероцоццус фаециум, Ентероцоццал Сурфаце Протеин есп ген, канали корена, полимераза ланчана реакција асаy

Sažetak

Ентероцоцци се генерално сматрају пролазним компонентама оралних бактерија које могу бити разлог за неколико оралних и системских инфекција, посебно оних које се односе на инфекције канала зубног корена. Циљ : Сврха актуелне студије била је да се испита појава Ентероцоццал Сурфаце протеина есп у Енероцоццус фаецалис који је изолован од заражених канала корена. Четрдесет узорака прикупљено је од ендодонтских пацијената који су похађали Одељење за конзервативно лечење на Стоматолошком факултету/Универзитету у Мосулу/Стоматолошкој наставној болници. Материјали и методе: Сви узорци су прегледани традиционално коришћењем ХиЦром ТМ Ентероцоццус фаециум Агар базних средњих и биохемијских тестова. 16srRNA секвенцирање је извршено да би се потврдио њихов идентитет помоћу технике ланчане реакције полимеразе. Онда су сви Ентероцоццус фаецалис изолације испитани због постојања есп генског кодирања за протеин ентероцоццал површине помоћу ПЦР напада. Резултати : Од 40 клиничких узорака који су добијени, 31 изолација је препозната као Е. фаецалис традиционалним методама, неочекивано су узгајани и други не-ентероцоцци генера на ХиЦром ТМ Ентероцоццус фаециум Агар базном медијуму. ПЦР производи за прајмере специфичне за секвенце добијене из целе дужине 16S рРНА генске секвенце која припада Е. фаецалис и ПЦР производима за одређени пример есп гена креирали су бендове на позицији 138bp односно 932 бп на агаросе гелу. Овај ген који је у корелацији са агрегацијом ове бактерије на зидовима канала откривен је у великим размерама (91%) из изолације. Закључци : ПЦР ассаy пружа тачну, брзу и осетљивију детекцију Е. фаецалиса. Пронађена је позитивна корелација између есп гена и ентерококних инфекција у каналима корена.

Reference

1. Mustafa EA, Hamdoon SM, Shehab EY. Molecular detection and identification of Enterococcus faecium isolated from dental root canals. Iraqi Journal of Science. 2021 May 30:1447-51.

2. Akhondnezhad M, Bakhti M, Nasrolahei M, Shabankhani B, Goli HR. Molecular detection of Enterococcal surface protein (esp) gene in Enterococcus faecalis isolated from dental calculus of patients in Sari, Iran. Research in Molecular Medicine. 2017 Aug 10;5(3):21-5.

3. Kouidhi B, Zmantar T, Mahdouani K, Hentati H, Bakhrouf A. Antibiotic resistance and adhesion properties of oral Enterococci associated to dental caries. BMC microbiology. 2011 Dec;11(1):1-7.

4. Siqueira JF, Rôças IN, Ricucci D. Microbial and nonmicrobial etiologies of endodontic diseases. Dalam: Ingle JI, Rotstein I. Endodontics 7th ed. Raleigh, North Carolina: PMPH-USA Ltd. 2019:85-109.

5. Wang L, Dong M, Zheng J, Song Q, Yin W, Li J, Niu W. Relationship of biofilm formation and gelE gene expression in Enterococcus faecalis recovered from root canals in patients requiring endodontic retreatment. Journal of endodontics. 2011 May 1;37(5):631-6.

6. Fallico L, Boldrin C, Grossato A, Franchin E, De Canale E, Tommasini T, Parisi SG, Manganelli R, Palu G. Molecular epidemiology of Enterococcus faecium isolates from an Italian hospital. Infection. 2011 Apr;39:127-33.

7. Wu H, Moser C, Wang HZ, Høiby N, Song ZJ. Strategies for combating bacterial biofilm infections. International journal of oral science. 2015 Mar;7(1):1-7.

8. Alnasra NA, Badran EF, Dajan N, Shehabi AA. Antimicrobial susceptibility and virulence factors of Enterococci colonizing intestinal tract of infants. The International Arabic Journal of Antimicrobial Agents. 2016 May 3;6(1).

9. Taglialegna A, Matilla-Cuenca L, Dorado-Morales P, Navarro S, Ventura S, Garnett JA, Lasa I, Valle J. The biofilm-associated surface protein Esp of Enterococcus faecalis forms amyloid-like fibers. npj Biofilms and Microbiomes. 2020 Mar 27;6(1):15.

10. Abdulrazzaq R, Faisal R. Efficiency of hichrome Enterococcus faecium agar in the isolation of Enterococcus spp. and other associated bacterial genera from water. Journal of Life and Bio Sciences Research. 2022 Jan 26;3(01):01-6.

11. Gary P, Hall G. Koneman’s Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology Color: Wolters Kluwer Health,2017.

12. Sedgley CM, Molander A, Flannagan SE, Nagel AC, Appelbe OK, Clewell DB, Dahlén G. Virulence, phenotype and genotype characteristics of endodontic Enterococcus spp. Oral microbiology and immunology. 2005 Feb;20(1):10-9.

13. Khalid I, Nayyef NS, Merkhan MM. A Taxonomic Study comparing the two types of Medicinal Leeches available in Iraq. Research Journal of Pharmacy and Technology. 2022 Mar 1;15(3):1119-22.

14. Al-Askary RA. Preparation and Evaluation of Glutamic Acid - Calcium Oxide Based Endodontic Sealer.Ph.D.thesis.Collage of Dentistry. Mosul University.Iraq.

15. Komiyama EY, Lepesqueur LS, Yassuda CG, Samaranayake LP, Parahitiyawa NB, Balducci I, Koga-Ito CY. Enterococcus species in the oral cavity: prevalence, virulence factors and antimicrobial susceptibility. PloS one. 2016 Sep 15;11(9):e0163001.

16. Durgesh BH, Alkheraif AA, Malash AM, Hashem MI, Assery MK, Al Asmari M, Durgesh P. Genotypic characterization of species isolated from the oral cavity and their pattern of antibiotic susceptibility. Asian biomedicine. 2016 Feb 1;10(1):49-53.

17. Weng PL, Ramli R, Hamat RA. Antibiotic susceptibility patterns, biofilm formation and esp gene among clinical Enterococci: is there any association?. International journal of environmental research and public health. 2019 Sep;16(18):3439.

18. Angeletti S, Lorino G, Gherardi G, Battistoni F, De Cesaris M, Dicuonzo G. Routine molecular identification of enterococci by gene-specific PCR and 16S ribosomal DNA sequencing. Journal of clinical microbiology. 2001 Feb 1;39(2):794-7.

19. d'Azevedo PA, Santiago KA, Furtado GH, Xavier DB, Pignatari AC, Titze-de-Almeida R. Rapid detection of vancomycin-resistant enterococci (VRE) in rectal samples from patients admitted to intensive care units. Brazilian Journal of Infectious Diseases. 2009;13:289-93.