ISTRAŽIVANJE p-SCN-Bn-DOTA-TRASTUZUMAB-a OBELEŽENOG RADIOAKTIVNIM I NERADIOAKTIVNIM LUTECIJUMOM I ITRIJUMOM: ZNAČAJAN KORAK ZA BUDUĆE PRIMENE

  • Marija Arev Univerzitet "Goce Delčev" – Fakultet medicinskih nauka
  • Marija Mirković Univerzitet u Beogradu – Institut za nuklearne nauke "Vinča"
  • Magdalena Radović Univerzitet u Beogradu – Institut za nuklearne nauke "Vinča"
  • Katarina Davalieva Makedonska akademija nauka i umetnosti, Istraživački centar za genetičko inženjerstvo i biotehnologiju “Georgi D Efremov”
  • Petre Makreski Univerzitet svetog Ćirila i Metodija, Prirodno-matematički fakultet, Hemijski institut
  • Paulina Apostolova Univerzitet u Beogradu – Institut za nuklearne nauke "Vinča"
  • Sanja Vranješ-Djurić Univerzitet u Beogradu – Institut za nuklearne nauke "Vinča"
  • Aleksandar Dimovski Makedonska akademija nauka i umetnosti, Istraživački centar za genetičko inženjerstvo i biotehnologiju “Georgi D Efremov”
  • Predrag Džodić Univerzitet u Nišu – Medicinski fakultet, Katedra za farmaciju
  • Emilija Janevik-Ivanovska Univerzitet "Goce Delčev" – Fakultet medicinskih nauka

Sažetak


Značaj leži u pripremi stabilnog, konjugata trastuzumaba korišćenjem neradioaktivnih LuCl3 i YCl3, preko p-SCN-Bn-DOTA. Ovaj pristup je ključan za određivanje potencijalnih fizičko-hemijskih promena u strukturi imunokonjugata nakon vezivanja metala. Nakon konjugacije, koristeći molarni odnos 1:20, izvedeno je sušenje zamrzavanjem da bi se dobili stabilni imunokonjugati za naknadnu analizu. Nekoliko hemijskih metoda je korišćeno da se karakteriše stabilnost antitela i zadržana imunoreaktivnost unutar formulisanih imunokonjugata. Dokaz integriteta proteina došao je iz SDS-PAGE elektroforeze, sa ujednačenim intenzitetom fragmenata (25 kDa za laki lanac, 50 kDa za teški lanac) što ukazuje na nerazgradnju antitela (1). IR i Ramanova spektroskopija su služile za verifikaciju sekundarnih strukturnih promena, uz prisustvo karakterističnih amidnih traka u oba spektra što ukazuje na zadržavanje prirodne sekundarne strukture (2). Koristeći MALDI-TOF-MS, određeno je 4,9 p-SCN-Bn-DOTA molekula po molekulu antitela. Obećavajući rezultati neradioaktivnog obeležavanja pružaju priliku za potencijalno obeležavanje radioaktivnim lutecijumom-177 i itrijumom-90, svaki sa specifičnom aktivnošću od 200 µCi/mL. Radioizotopi su inkubirani sa p-SCN-Bn-DOTA-trastuzumabom sat vremena na 40 ºC. Procena radiohemijske čistoće i stabilnosti je sprovedena korišćenjem ITLC-SG sistema. Optimalne mobilne faze, posebno 0,4 M metanol:natrijum acetat (1:1) za itrijum-90 i 0,9% NaCl za lutecijum-177, olakšale su detaljno ispitivanje. Postignuta je izuzetna efikasnost radioaktivnog obeležavanja, >96% za itrijum-90 i <99% za lutecijum-177. Procene stabilnosti posle 72 sata pokazale su veću stabilnost 177Lu-p-SCN-Bn-DOTA-trastuzumaba (<1,5% oslobađanja lutecijuma-177) u poređenju sa 90I obeleženim kolegom (<17% otpuštanje itrijuma-90). Ova studija naglašava uspešan razvoj radioimunokonjugata, pozicionirajući ovaj agens za potencijalnu primenu in vivo istraživanja.

Reference

1.     Sterjova M, Džodić P, Ruskovska T, Apostolova P, Risteski M, Janevik-Ivanovska E. Preparation and integrity examination of freeze dried kit of trastuzumab-immunoconjugates and cold labeled immunoconjugtes by applying SDS-PAGE electrophoresis. Acta med. Median. 2019; 58(3): 15-23.

2. Sterjova M, Džodić P, Makreski P, Duatti A, Risteski M, Janevik-Ivanovska E. Vibrational spectroscopy as a tool for examination to the secondary structure of metal-labeled trastuzumab immunoconjugates. J. Radioanal. Nucl. Chem.  2019; 320(1): 209-218.

Objavljeno
2023/10/25
Broj časopisa
Vol. 73 Br. Suppl. 4 (2023): Arhiv za farmaciju - Treći naučni simpozijum SFUS
Rubrika
Poster prezentacije
Autori koji objavljuju u ovom časopisu pristaju na sledeće uslove:

  1. Autori zadržavaju autorska prava i pružaju časopisu pravo prvog objavljivanja rada i licenciraju ga "Creative Commons Attribution licencom" koja omogućava drugima da dele rad, uz uslov navođenja autorstva i izvornog objavljivanja u ovom časopisu.

  2. Autori mogu izraditi zasebne, ugovorne aranžmane za neekskluzivnu distribuciju članka objavljenog u časopisu (npr. postavljanje u institucionalni repozitorijum ili objavljivanje u knjizi), uz navođenje da je članak izvorno objavljen u ovom časopisu.

  3. Autorima je dozvoljeno i podstiču se da postave objavljeni članak onlajn (npr. u institucionalni repozitorijum ili na svoju internet stranicu) pre ili tokom postupka prijave rukopisa, s obzirom da takav postupak može voditi produktivnoj razmeni ideja i ranijoj i većoj citiranosti objavljenog članka (Vidi Efekti otvorenog pristupa).