U susret pravilnom određivanju veličine nanostruktura: analiza uticaja uslova merenja i pripreme uzorka na razultate procene veličine nanokapi i nanočestica
Sažetak
Fizičkohemijske osobine mnogih aktivnih supstanci otežavaju ostvarivanje farmakoloških efekata. Kako bi se identifikovane prepreke prevazišle, visoka očekivanja postavljena su pred nanosisteme - nosače za isporuku aktivnih supstanci, uz značajna ulaganja u njihov razvoj. Nanotehnološki pristup formulaciji leka mnogo je više od pukog smanjenja veličine. Imajući u vidu kompleksnost nanosistema, izazove koji se sreću u njihovoj karakterizaciji, te evidentan nedostatak protokola ispitivanja, relevanta evropska istraživačka/regulatorna tela izdala su vodiče, sumirajući značajne parametre karakterizacije nanosistema. Veličina/distribucija veličina (per se i u biorelevantnim uslovima) od suštinske su važnosti za postizanje očekivanih performansi, predstavljajući kritične atribute kvaliteta. Cilj rada bio je pokazati kako se pri različitim uslovima merenja/načinima pripreme istog uzorka dobijaju značajno različiti rezultati procene veličine, te ponuditi optimalan protokol merenja dinamičkim rasipanjem svetlosti (DLS), uz komplementarno ispitivanje mikroskopijom atomskih sila. Kao test uzorci korišćeni su hidrofilna nanoemulzija i vodena disperzija polimernih nanočestica, a kao medijumi za razblaživanje visokoprečišćena voda, izotonični fosfatni pufer (PBS, pH 7,4) i biorelevantni medijum obogaćen proteinima seruma. Merenja su sprovedena primenom batch-mode DLS, (ZetasizerNano), i na mikroskopu AutoProbe CP-Research. Primećene su značajne razlike u vrednostima veličine nanokapi/nanočestica zavisno od tipa medijuma i nivoa razblaženja. Nije se moglo sa sigurnošću potvrditi formiranje protein korone nakon inkubacije u biorelevantnom medijumu. Za procenu veličine per se, prednost je data PBS-u kao disperzantu. Optimalan nivo razblaženja za nanočestice bio je 1:10 (Z-ave=59,16±0,46nm), a za nanoemulziju 1:100 (Z-ave=73,5±0,75nm). Radi adekvatnog tumačenja, potrebno je da izveštaj DLS merenja, pored Z-ave i indeksa polidisperznosti, sadrži barem još podatke o atenuaciji i odsečku korelacione funkcije.
Reference
Halamoda-Kenzaoui B, Holzwarth U, Roebben G, Bogni A, Bremer-Hoffmann, S. Mapping of the available standards against the regulatory needs for nanomedicines. Wiley Interdiscip. Rev. Nanomed. Nanobiotechnol. 2019; 11: e1531.
- Autori zadržavaju autorska prava i pružaju časopisu pravo prvog objavljivanja rada i licenciraju ga "Creative Commons Attribution licencom" koja omogućava drugima da dele rad, uz uslov navođenja autorstva i izvornog objavljivanja u ovom časopisu.
- Autori mogu izraditi zasebne, ugovorne aranžmane za neekskluzivnu distribuciju članka objavljenog u časopisu (npr. postavljanje u institucionalni repozitorijum ili objavljivanje u knjizi), uz navođenje da je članak izvorno objavljen u ovom časopisu.
- Autorima je dozvoljeno i podstiču se da postave objavljeni članak onlajn (npr. u institucionalni repozitorijum ili na svoju internet stranicu) pre ili tokom postupka prijave rukopisa, s obzirom da takav postupak može voditi produktivnoj razmeni ideja i ranijoj i većoj citiranosti objavljenog članka (Vidi Efekti otvorenog pristupa).